武漢貝科新肽-蛋白互作

詢盤留言 |投訴|申領(lǐng)|刪除 產(chǎn)品編號(hào)：595645429 更新時(shí)間：2025-04-13

武漢貝科新肽科技有限公司

主營(yíng)業(yè)務(wù)：原位雜交,亞細(xì)胞定位,蛋白互作,啟動(dòng)子篩選
公司官網(wǎng)：bkxtbio.com.cn
公司地址：湖北省武漢市洪山區(qū)關(guān)山大道289號(hào)紫菘逸景華庭二期109棟2層2002-3號(hào)

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供貨總量 : 不限
價(jià)格說(shuō)明 : 議定
包裝說(shuō)明 : 不限
物流說(shuō)明 : 貨運(yùn)及物流
交貨說(shuō)明 : 按訂單

亞細(xì)胞定位原理

利用GFP、RFP等熒光蛋白具有的熒光性質(zhì)和靈敏性，來(lái)示蹤細(xì)胞內(nèi)的蛋白。將目標(biāo)蛋白與熒光蛋白的N端或者C端融合，通過(guò)瞬轉(zhuǎn)或穩(wěn)轉(zhuǎn)，使該融合蛋白在受體材料細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，目標(biāo)蛋白會(huì)牽引熒光蛋白一起定位到目標(biāo)細(xì)胞器，經(jīng)過(guò)激光共聚焦顯微鏡激光照射，熒光蛋白會(huì)發(fā)出熒光，蛋白互作，通過(guò)觀察熒光蛋白在細(xì)胞內(nèi)顯示的位置，從而可以確定目標(biāo)蛋白的亞細(xì)胞定位情況，即可對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行準(zhǔn)確定位。

細(xì)胞分餾和免疫印跡：先通過(guò)差速離心等方法將細(xì)胞勻漿分離成不同的亞細(xì)胞組分，如細(xì)胞核、線粒體、細(xì)胞質(zhì)等。然后，利用免疫印跡技術(shù)，使用針對(duì)目標(biāo)蛋白的特異性來(lái)檢測(cè)該蛋白在各個(gè)亞細(xì)胞組分中的存在情況，以此推斷其亞細(xì)胞定位。

電子顯微鏡技術(shù)：包括免疫電鏡技術(shù)等，可在超微結(jié)構(gòu)水平上對(duì)細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)等生物分子進(jìn)行定位。通過(guò)將特異性與細(xì)胞內(nèi)的目標(biāo)蛋白結(jié)合，再用電子顯微鏡觀察標(biāo)記物的位置，能夠地確定目標(biāo)蛋白在細(xì)胞內(nèi)的亞細(xì)胞定位。

直接法

將標(biāo)記的特異性熒光，直接加在抗原標(biāo)本上，經(jīng)一定的溫度和時(shí)間的染色，用水洗去未參加反應(yīng)的多余熒光，室溫下干燥后封片、鏡檢。

間接法

如檢查未知抗原，先用已知未標(biāo)記的特異（）與抗原標(biāo)本進(jìn)行反應(yīng)，用水洗去未反應(yīng)的，再用標(biāo)記的抗（第二）與抗原標(biāo)本反應(yīng)，使之形成—抗原—復(fù)合物，再用水洗去未反應(yīng)的標(biāo)記，干燥、封片后鏡檢。如果檢查未知，則表明抗原標(biāo)本是已知的，待檢為，其它步驟的抗原檢查相同。

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