全自動(dòng)核酸提取儀的作用
隨著分子生物學(xué)技術(shù)的高速發(fā)展,以核酸雜交、核酸擴(kuò)增及核酸序列分析等為代表的分子診斷和檢測(cè)技術(shù)的重要作用日益凸顯。樣品前處理所花費(fèi)的時(shí)間占整個(gè)分析過(guò)程的60%,全自動(dòng)核酸提取儀器,而檢測(cè)誤差的90%出現(xiàn)在前處理領(lǐng)域。核酸提取作為分子診斷實(shí)驗(yàn)關(guān)鍵的一步,其獲得的核酸質(zhì)量?jī)?yōu)劣直接影響到下游分子生物學(xué)試驗(yàn)的成敗。
全自動(dòng)核酸提取儀的提取原理
采用離心柱法的儀器:離心柱法核酸提取儀主要采用離心機(jī)和自動(dòng)移液裝置相結(jié)合的方法,通量一般在1-12個(gè)樣本,操作時(shí)間和手工提取差不多,并不能提高實(shí)際工作效率,且價(jià)格昂貴,全自動(dòng)核酸提取儀器報(bào)價(jià),不同型號(hào)儀器的耗材也不能通用,僅適合經(jīng)費(fèi)充足的大型實(shí)驗(yàn)室使用。
采用磁珠法的儀器:以磁珠為載體,利用磁珠在高鹽低PH值下吸附核酸,全自動(dòng)核酸提取儀器廠家,在低鹽高PH值下與核酸分離的原理,再通過(guò)移動(dòng)磁珠或轉(zhuǎn)移液體來(lái)實(shí)現(xiàn)核酸的整個(gè)提取純化過(guò)程。由于其原理的特別性,所以可設(shè)計(jì)成很多種通量,既可以單管提取,也可以提取8-96個(gè)樣本,且其操作簡(jiǎn)單快捷,一批次上機(jī)提取時(shí)間為9~40min(不同樣本不同廠家時(shí)間不同),大大提高了實(shí)驗(yàn)效率,且成本低廉,因而可以在不同實(shí)驗(yàn)室使用,是目前市場(chǎng)上的主流儀器。
全自動(dòng)核酸提取儀如何操作呢?
核酸提取儀配套試劑及其操作步驟,買(mǎi)了儀器后一定要考慮后續(xù)使用配套試劑的問(wèn)題:
1)配套試劑是否齊全。不同樣本類(lèi)型的提取試劑盒產(chǎn)品鏈?zhǔn)欠裢暾?/p>
2)配套試劑是不是預(yù)封裝。非預(yù)封裝的試劑需要實(shí)驗(yàn)員用移液器加入裂解液、洗滌液和洗脫液等試劑,并沒(méi)有減少人工操作時(shí)間;
3)提取前除了加樣本外。是否需要添加蛋白酶K,由于有些公司并沒(méi)有掌握裂解液中預(yù)封裝蛋白酶K且常溫儲(chǔ)存的技術(shù),蛋白酶K需要-20℃單獨(dú)保存,需即用即加。每個(gè)樣本多加一步蛋白酶K,96個(gè)樣本多了10~15min左右的操作時(shí)間。
4)配套試劑的保存溫度。有些廠家的提取試劑需要在2—8℃運(yùn)輸保存,冷鏈運(yùn)輸增加運(yùn)輸成本,保存需要在冰箱中,而預(yù)封裝提取試劑體積較大,在用量大特別像新冠這樣大批量的使用,完全沒(méi)有足夠冰箱可以進(jìn)行一段時(shí)間試劑的儲(chǔ)存空間。
5)提取后的擴(kuò)增效率。提取核酸時(shí)觀察磁珠殘留率并且檢測(cè)提取核酸質(zhì)量!
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