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武漢科銳諾生物科技有限公司
主營：外泌體,透射電鏡,掃描電鏡,石蠟切片等技術(shù)服務(wù)
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| 先生： |
雜交結(jié)束后，去除雜交液，立即于室溫把濾膜放入大體積（300-500ml）的2×SSC和0.1% SDS溶液中，輕輕振搖5分鐘，并將濾膜至少翻轉(zhuǎn)一次。重復(fù)洗 一次，同時應(yīng)避免膜干涸。
68℃用300-500ml 1×SSC和0.1% SDS溶液洗膜兩次，每次1-1.5小時。此時已可進行自顯影。如背景很高或?qū)嶒炓髧栏竦南茨l件，可用300-500ml 0.2×SSC和0.1% SDS的溶液于68℃將濾膜浸泡60分鐘。
把濾膜放在紙巾上于室溫晾干后，把濾膜（編號面朝上）放在一張保鮮膜上，并在保鮮膜上作幾個不對稱的標記，以使濾膜與性自顯影片位置對應(yīng)。
用第二張保鮮膜蓋住濾膜。加X片并加上增感屏于-70℃曝光12-16小時。
底片顯影后，在底片上貼一張透明硬紙片。在紙上標記陽性雜交信號的位置，提供酵母雙雜交技術(shù)服務(wù)，同時在不對稱分布點的位置上作出標記?？蓮牡灼先∠峦该骷?，通過對比紙上的點與瓊脂上的點來鑒定陽性菌落。
適用場景
1、高靈敏度地檢測蛋白-蛋白的交互作用；
2、尋找在蛋白-蛋白交互作用中起關(guān)鍵作用的結(jié)構(gòu)域或活性位點；
3、尋找與靶蛋白相互作用的新蛋白；
4、尋找具有藥1物治1療作用的小分子多肽；
5、尋找調(diào)控蛋白質(zhì)相互作用的化合物；
6、繪制蛋白質(zhì)相互作用圖譜。
酵母雙雜交技術(shù)的優(yōu)點
1、無需純化蛋白；
2、檢測在活1細胞內(nèi)進行，可以在一定程度上代表體內(nèi)的真實情況；
3、檢測的結(jié)果是基因表達產(chǎn)物的積累效應(yīng)，因而可檢測存在于蛋白質(zhì)之間的微弱的或暫時的相互作用；
4、酵母雙雜交系統(tǒng)可采用不同組織、器1官、細胞類型和分化時期材料構(gòu)建cDNA文庫，并能分析細胞質(zhì)、細胞核等多種亞細胞部位的蛋白。
分子病理學(xué)是與分子生物學(xué)、細胞遺傳學(xué)等學(xué)科相互滲透，在蛋白質(zhì)和核酸等生物大分子水平上研究疾病病因、發(fā)病機制、形態(tài)變化及功能損害等方面發(fā)生和發(fā)展規(guī)律的新的分支學(xué)科，對疾病的病因、發(fā)展、發(fā)病機制及形態(tài)變化，從傳統(tǒng)形態(tài)學(xué)概念深入至分子或基因水平，分子病理已成為腫1瘤病理研究中重要的內(nèi)容和手段。①細胞特異性mRNA轉(zhuǎn)錄的定位，可用于基因圖譜，基因表達和基因組進化的研究；
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第4年
