分子病理學(xué)是與分子生物學(xué)、細(xì)胞遺傳學(xué)等學(xué)科相互滲透,在蛋白質(zhì)和核酸等生物大分子水平上研究疾病病因、發(fā)病機制、形態(tài)變化及功能損害等方面發(fā)生和發(fā)展規(guī)律的新的分支學(xué)科,對疾病的病因、發(fā)展、發(fā)病機制及形態(tài)變化,從傳統(tǒng)形態(tài)學(xué)概念深入至分子或基因水平,分子病理已成為腫1瘤病理研究中重要的內(nèi)容和手段。①細(xì)胞特異性mRNA轉(zhuǎn)錄的定位,可用于基因圖譜,基因表達(dá)和基因組進化的研究;
既要充分保留被測核酸,(特別是RNA)不被降解,又要盡可能維持原有組織或細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)。
步驟:基本與免1疫組織化學(xué)技術(shù)相似,即組織要求新鮮和迅速投入固定液。固定液為4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.0-7.6),含有1/1000 DEPC。標(biāo)本較大時用刀片切成厚度不超過4mm的小塊,分子病理技術(shù)服務(wù),固定1小時即可,較大的標(biāo)本固定不要超過2小時。某些組織對過度固定尤其敏感,如動物大腦,固定時間30-40分鐘,一般不要超過1小時。取材過程中避免手指、唾液和未經(jīng)RNA酶抑制處理的器具接觸標(biāo)本。冷凍切片以厚5~30um佳,40℃烤箱內(nèi)干燥2小時后儲存在-80℃超低溫冰箱,在-20℃可保存2~3周,在-70℃可保存數(shù)月之久。
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