原位雜交第二天
1.
1)將探針回收,放于-20C保存(通常探針可重復(fù)使用十次左右)。
2)加入50%甲酰胺/2XSSCT溶液1毫升,60℃,湖北原位雜交,放置30分鐘,重復(fù)一次。
3)置換2XSSCT1ml,60℃,放置15分鐘。
4)置換0.2XSSCT1ml,60℃,放置30分鐘,重復(fù)一次。
2.
1)用MABT洗兩次,每次五分鐘,原位雜交檢測(cè),放在搖床輕輕搖動(dòng)。
2)室溫下加1ml 1:2:7溶液,時(shí)間為一小時(shí)。
3)按1:3000的比例在1:2:7溶液中加入酶連,4C 冰箱過(guò)夜。
原位雜交是一種非常重要的技術(shù),因?yàn)樗梢栽诩?xì)胞或組織的自然環(huán)境中研究基因表達(dá)和調(diào)控。它可以幫助科學(xué)家們了解基因在特定組織或細(xì)胞類型中的作用和功能,以及在疾病發(fā)生和發(fā)展過(guò)程中的變化。此外,這項(xiàng)技術(shù)還可以用于檢測(cè)基因變異和染色體異常,以及監(jiān)測(cè)細(xì)胞生長(zhǎng)和凋亡。
雖然原位雜交是一項(xiàng)非常有用的技術(shù),但它也有一些限制。首先,染色體原位雜交,探針的特異性可能受到干擾,導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。其次,探針的數(shù)量和位置可能受到細(xì)胞或組織中其他成分的影響。此外,這項(xiàng)技術(shù)的操作比較繁瑣,需要專門(mén)的技術(shù)和設(shè)備,而且需要大量的實(shí)驗(yàn)和對(duì)照才能獲得可靠的結(jié)果。
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